Prionsabail Shintéis Aigéad Núicléach

Déantar an tsintéis aigéid núicléigh ag baint úsáide as an modh tríghlicríde aimíde sialic pas soladach, trína ndéantar deireadh 3′ an DNA a dhíluailithe ar fhoshraith soladach phas agus cuirtear núicléatídí sa treo 3′ go 5′ go dtí go ndéantar an blúire DNA atá ag teastáil a shintéisiú. .Tá sé seo difriúil ó shintéis DNA trí chur i bhfeidhm DNA polymerase.

Tá deireadh 3′ an chéad bhonn díluailithe ar CPG le linn sintéise, tá an 5′-OH den chéad bhonn cosanta le di-p-tolyl trityl DMT, tá an aimínghrúpa ar an mbonn cosanta le haigéad beansóch agus an 3′ Cuirtear -OH i ngníomh ansin le comhdhúil aimínfosfáit.Cruthaíonn bonn 1 den bhonn 5 5′-OH de 1 bhonn agus 3′-OH den chéad bhonn eile tríghlicríd fosfite, a ocsaídítear ansin le hiaidín go tríghlicríd fosfáite, baintear an cosantóir ar an dara bonn 5′-OH le trí thimthriallta DM aigéad dichloroacetic a chur leis tríd an gcéad bhonn eile a chur leis, agus tar éis an cosantóir ar an 5′-OH a shintéisiú, baintear é le haigéad lag Tá an blúire dícheangailte ón roisín soladach le hiodrocsaíd amóiniam tiubhaithe, baintear an cosantóir as an mbonn le hiodrocsaíd amóiniam tiubhaithe faoi théamh, baintear an hiodrocsaíd amóiniam, déantar an blúire a thriomú i bhfolús, agus déantar an t-aigéad núicléach a íonú trí chrómatagrafaíocht leachtach nó LEATHANACH.

Céimeanna Sintéise Oligo

Ag díbhlocáil

Tá anBaintear grúpa cosanta DMT 5 deireadh trí réiteach TCA a chur leis.

Gníomhachtú

Measc an gníomhaí leis an monaiméir oligonucleotide chun an monaiméir gníomhach oligonucleotide a fhoirmiú.

Cúpláil

Imoibríonn an grúpa hiodrocsaile 5-críochfort leis an oligonucleotide gníomhach idirmheánach in imoibriú comhdhlúthúcháin frith-ghéine chun banna tríghlicríde fosfite éagobhsaí a fhoirmiú.

Caping 

Trí oibreán uasteorannaithe a chur leis, déanann sé imoibriú uasteorannaithe aicéitilúcháin le ró-ghrúpaí hiodrocsaile nach bhfuil páirteach san imoibriú comhdhlúthaithe.

Ocsaídiú 

Nuair a chuirtear tuaslagán iaidín ina bhfuil uisce leis, imoibríonn sé le bannaí fosfite éagobhsaí trí ocsaídiú chun bannaí tríghlicríde aigéad fosfarach cobhsaí a fhoirmiú.

Scoilteacht Cyanoethyl

An táirge aigéid núicléacha tar éis sintéise, le réiteach DEA ​​a chur leis chun an grúpa cyanoethyl a bhaint as an nasc triglyceride fosfáit.

Scoilte&Díchosaint

Glantar na blúirí aigéid núicléigh ón iompróir pas soladach trí thuaslagán hiodrocsaíd amóiniam tiubhaithe a chur leis agus ansin téitear iad chun na grúpaí cosanta a bhaint as bannaí hidrigine na mbonn.